凈信冷凍組織研磨儀與藥用植物三七的應(yīng)用

三七是我國重要的藥用植物之一，又名田七，人參三七等,為五加科人參屬植物,是我國傳統(tǒng)名貴藥物，自古就有“止血神藥”的美稱。距今已有400多年的應(yīng)用歷史，在國內(nèi)外久負(fù)盛名。三七主產(chǎn)于云南文山。品種缺乏是三七種植存在的重要技術(shù)問題，育種標(biāo)記和方法則是困擾三七育種的重要問題，這與我們對三七的遺傳基礎(chǔ)缺乏了解有關(guān)。

研究發(fā)現(xiàn)，三七是在9100萬年前與茄科植物馬鈴薯和辣椒分化開來，三七與四倍體的人參屬植物人參和西洋參有9383個共同的基因，976個特有的轉(zhuǎn)錄本.，基因組測序的完成將為三七全基因組選擇育種、功能基因的發(fā)現(xiàn)等提供了基礎(chǔ)，也有利于三七產(chǎn)業(yè)關(guān)鍵技術(shù)問題的解決。

三七樣品中提取DNA，中國農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院之前采用研缽手工研磨的方法，在研缽內(nèi)倒入液氮，在凍干狀態(tài)下快速研磨，研磨過程中樣品不易研磨，整體研磨樣品不充分，影響實(shí)驗(yàn)效果，因此選擇上海凈信冷凍組織研磨儀。

實(shí)驗(yàn)材料和器具：

樣品：三七

工具：凈信冷凍組織研磨儀（JXFSTPRP-CL-24）

耗材：鋼罐，研磨珠、液氮、剪刀、鑷子等

實(shí)驗(yàn)步驟：

1、準(zhǔn)備鋼罐2個，研磨珠若干顆；

2、取三七組織剪成小塊與研磨珠一同放入鋼罐中，將蓋子擰緊；

3、將鋼罐置于裝有液氮的容器內(nèi)，液氮容量沒過鋼罐即可，冷凍若干分鐘，取出時戴手套或使用鑷子夾取避免液氮凍傷；

4、將適合器放入研磨儀器中固定好，然后開機(jī)并將制冷功能打開進(jìn)行預(yù)冷

5、將浸泡過液氮的鋼罐放置適合器內(nèi)，樣品盡量對稱放置，以保證研磨時的受力平衡，旋緊垂直定位螺旋，將安全鎖扣緊。設(shè)置參數(shù)，程序結(jié)束后即可得到破碎粉末；

6、研磨完畢后請關(guān)閉電源，將安全鎖歸位；

7、完成后續(xù) DNA 提取步驟。

注意事項：

1、每支鋼罐內(nèi)的樣品量一般不超過罐體體積的三分之二，樣品量過多會影響研磨效果。

2、樣品盡量對稱放置，以保證研磨時的受力平衡。

3、樣品夾取過程中戴手套及使用鑷子夾取避免液氮凍傷。

實(shí)驗(yàn)過程、結(jié)果圖示：

實(shí)用儀器介紹：

此款儀器為上海凈信實(shí)業(yè)發(fā)展有限公司生產(chǎn)的全新全自動樣品冷凍研磨儀，它是一種特殊的、快速的、高效率的、多試管的一致系統(tǒng)。可以在較短的時間內(nèi)、 低溫狀態(tài)下完成對各種樣品的研磨、粉碎、混合及細(xì)胞破壁，以保留蛋白質(zhì)活性。